Tuberkuliozės kraujo tyrimas vaikams ir suaugusiems

Pavojinga infekcinė liga reikalauja ne tik laiku diagnozuoti, bet ir periodiškai stebėti gydymo rezultatus. Dėl tuberkuliozės kraujo tyrimai laikomi informatyviais metodais. Kokie tyrimo metodai yra naudojami, kaip jie skiriasi? Apžvelgiant kraujo parametrų tikrinimo metodus, galite sužinoti apie analizės ypatybes, informatyvumą, rezultatų gavimo greitį.

Kas yra tuberkuliozė?

Sunkios infekcinės ligos atsiranda lėtine forma. Tuberkuliozę sukelia bakterijos - Kocho lazdelė (Mycobacterium tuberculosis kompleksas), kurios yra atsparios išoriniam poveikiui. Šios ligos savybės yra:

• kvėpavimo organai yra paveikti - plaučių forma;
• sąnariai, kaulai, limfmazgiai, šlapimo sistema - ekstrapulmoninė išvaizda;
• infekcija dažnai pasireiškia per orą lašelius, dažniau kontaktuojant per maistą nuo motinos iki vaisiaus per placentą.

Tuberkuliozėje išskiriamos atviros ir uždaros vystymosi formos. Pirmuoju atveju pacientas yra užkrečiamas, pavojingas kitiems, yra nešiklis ir ekskrecinės bakterijos. Jis gydomas specialiose klinikose. Uždaroje formoje liga panaši į šaltą, į aplinką nepatenka pavojingi mikrobai. Infekcijai būdingi tokie simptomai:

• depresija;
• švelnus vakare;
• karščiavimas;
• pernelyg didelis prakaitavimas naktį;
• patinę limfmazgiai;
• apetito sutrikimas;
• neramus miegas;
• silpnumas;
• kosulys;
• svorio netekimas;
• tachikardija.

Manoma, kad žmonės, kenčiantys nuo prastų socialinių ir gyvenimo sąlygų, turintys žemą gyvenimo lygį, kenčia nuo tuberkuliozės. Gydytojai mano, kad pagrindinis infekcijos atsiradimo veiksnys yra imuniteto sumažėjimas. Tuberkulio bacilė, įsiskverbianti į kūną, gali ten gyventi ilgą laiką, aktyviai sumažėjus organizmo apsaugai. Patologijos vystymosi priežastys dažnai yra:

• stresinės situacijos;
• nėštumas;
• prasta mityba;
• lėtinės ligos;
• piktnaudžiavimas alkoholiu;
• ŽIV infekcija;
• narkomanija;
• rūkymas

Kraujo tyrimas tuberkuliozei

Pagrindiniai infekcijos diagnozavimo metodai yra Mantoux testas, atliekamas vaikystėje, ir fluorografija suaugusiems. Manoma, kad tuberkuliozės kraujo tyrimas yra tikslesnis ir informatyvesnis. Šis metodas turi privalumų:

• jokių kontraindikacijų;
• diagnozė nustatoma per trumpą laiką;
• nereikia atlikti pakartotinių tyrimų;
• neteisingi teigiami rezultatai neįtraukiami;
• Mantoux testą pakeičia vaikas su draudimu jį įgyvendinti.

Kokius tyrimus reikia atlikti pacientui, turinčiam įtariamą tuberkuliozės infekciją, gydytojas, atsižvelgdamas į klinikinį vaizdą, nusprendžia. Yra keletas tyrimų, kurie naudojami įvairiuose ligos etapuose. Tarp pirmųjų ir privalomų metodų:

• pilnas kraujo kiekis - lemia uždegiminio proceso buvimą organizme;
• biocheminiai tyrimai - keičiant kraujo struktūroje esančius baltymus atskleidžiama ligos forma ir stadija.

Norėdami išsiaiškinti tuberkuliozės diagnozę, atlikite papildomus kraujo tyrimus. Gydytojai skiria pacientams:

• PCR - polimerazės grandininė reakcija - yra informatyvi, trumpą laiką suteikia išsamų ligos išsivystymo vaizdą, jis naudojamas ekstrapulmoninei infekcijai, ankstyvai diagnozei, kontroliniam gydymui.
• ELISA (imunosorbento) tyrimas - tai specifinių antikūnų, esančių kraujyje, kiekis infekciniam agentui - Koch lentynai.
• T-SPOT yra modernus tyrimo metodas, naudojamas ŽIV infekcijai, kuriam būdingas tikslumas.

Kai reikia atlikti analizę

Vaikams kyla rizika susirgti tuberkulioze. Be to, kad jų imuninė sistema nėra visiškai suformuota, liga gali neigiamai paveikti visas kūno funkcijas. Atliekami tuberkuliozės kraujo tyrimai:

• vaikai, sergantys ligoniais;
• kūdikiai, turintys mišrių rezultatų po Mantoux testo;
• Piliečiai, dirbantys vaikų medicinos, švietimo įstaigose (vaikų darželiuose, mokyklose).

Tyrimo indikacijos yra kontaktas su ligos nešikliu. Dovanoti kraują tuberkuliozei reikia iš tų, kurie nori dirbti maitinimo įstaigose. Analizės yra numatytos įtariamiems patologiniams procesams arba patvirtinti tuberkuliozės infekciją, kai pacientas pastebėjo:

• vaizdinio sujungimas su fluorografija, radiografija;
• temperatūros padidėjimas vakare;
• svorio mažinimas;
• lėtinis kosulys;
• naktinis prakaitavimas;
• stiprus silpnumas;
• apetito stoka;
• neramus miegas su košmarais.

Visiškas kraujo kiekis tuberkuliozei

Nėra specialių žymenų, padedančių nustatyti šią infekcinę ligą. Kraujo tyrimas tuberkuliozei atskleidžia uždegimo ir patologinių procesų buvimą tam tikruose etapuose. Dekoduojant atkreipkite dėmesį, kad plėtros atveju:

• infiltracija (pradinis ligos etapas) - ESR padidėja (eritrocitų nusėdimo greitis), mažai kinta leukocitai;
• platinama forma (platus platinimas) - pastebimas geras veiklos rezultatų pablogėjimas;
• proceso tylėjimas - rezultatai tampa normalūs.

Laboratorijoje atliekamas pilnas kraujo tyrimas. Pacientas atlieka tvoros biomateriją pirštų tyrimui. Rezultatai yra paruošti per kelias valandas. Šio metodo trūkumas yra tas, kad negalite atlikti tikslios diagnozės. Svarbūs rodikliai, kai dekoduojami rezultatai:

• ESR tuberkulioze - 80 mm / val., Kuris rodo aktyvų uždegiminį procesą. Moterims normalioji vertė vyrams - 20 mm / val. - 15;
• leukocitų skaičius - pažymėkite perteklių (norma yra 4-9 x10 9 laipsnių / l);
• sumažėjo limfocitų skaičius;
• eozinofilų skaičius padidėjo iki 8% (suaugusiųjų norma yra 0-5).

Iššifruojant bendrą kraujo tuberkuliozės analizę atkreipkite dėmesį į nukrypimą nuo raudonųjų kraujo kūnelių standarto. Šis rodiklis priklauso nuo ligos pobūdžio:

• lėtai, pažeidimo taško lokalizacija, skaičius yra normalus, tačiau jų spalvos pokyčiai, hemoglobino kiekis eritrocituose mažėja;
• su dideliu infiltracija, raudonųjų kraujo kūnelių dydžiu ir jų skaičiumi.

Biocheminiai

Atliekant šį tyrimą, kraujas paimamas iš venų, rezultatas gaunamas kitą dieną. Tinkamai dekoduojant rodiklius, galima anksti nustatyti sunkias ligas. Deja, biocheminis tuberkuliozės kraujo tyrimas nepateikia tikslios diagnozės. Tyrimas turi šiuos tikslus:

• periodinis gydymo proceso stebėjimas;
• homeostazės sutrikimų korekcija (kūno vidinės aplinkos stabilumo užtikrinimas);
• nustatyti narkotikų poveikį, šalutinį poveikį.

Tuberkuliozėje biocheminiai kraujo parametrai priklauso nuo ligos stadijos, komplikacijų ir kartu patologijų. Atšifruojant atliktą analizę:

• su neaktyvia infekcijos forma, bendras baltymas, baltymų frakcijos yra normalios;
• ūmios ligos eigoje, kai pradeda progresuoti lėtinė tuberkuliozės infekcijos forma, sumažėja albumino-globulino santykis (norma yra 15, -2,3).

Biocheminiai tyrimai bakterinės infekcijos vystymo metu padeda stebėti kepenų ir inkstų būklę. Siekiant įvertinti paciento sveikatos būklę, ypač sunkios ligos formos atveju, atkreipkite dėmesį į šiuos kraujo tyrimus tuberkuliozei:

• tiesioginis ir bendras bilirubinas (žemiau normalaus);
• AST - aspartato aminotransferazė (padidinta);
• ALT - alanino aminotransferazė (padidėja).

Šiuo metodu tyrimai greitai nustato specifinių antikūnų, esančių tuberkuliozės sukėlėjo - Kocho lazdelės, buvimą kraujyje. ELISA - fermento imunologinis tyrimas - naudojamas kaip alternatyva Mantoux testui. Rezultatai yra paruošti per dvi valandas. Atliekant tyrimus laboratorijoje:

• pacientas paima kraują iš venų;
• Biomedžiaga apdorojama specialiu tirpalu;
• laukia ryšio tarp antigeno ir antikūno;
• teigiamas rezultatas, registruojama fermento reakcija.

ELISA analizės nebuvimas - nesant 100% tikslumo, nesugebėjimas nustatyti ligos stadijos. Galima gauti klaidingus teigiamus ir klaidingus neigiamus rezultatus. Nustatyti antikūnai prieš tuberkuliozę ne visada rodo ligą. Neigiamas rezultatas nebūtinai yra infekcijos nebuvimas. Amg imunoglobulinas tyrime nenustatytas, jei:

• pradinis infekcijos etapas, kai jis dar nepakankamai išplėtotas;
• paciento imunodeficito būseną.

Teigiamas rezultatas yra tuberkuliozės buvimas imunoglobulino testuose Amg. Tai gali rodyti tokius procesus organizme:

• randama aktyvi ligos, kuri nėra plačiai paplitusi, forma;
• imunoglobulinai atsirado neseniai skiepijus vaiką nuo tuberkuliozės ar praeities ligos (klaidingas teigiamas rezultatas);
• yra didelių gydymo pokyčių;
• pacientas turi tuberkuliozę.

PCR diagnostika

Polimerazės grandininės reakcijos (PCR) gydytojų metodas nustato, jei yra prielaida apie diagnozę, ir būtina ją patvirtinti. Šioje analizėje biomedžiaga yra ne tik kraujas, skrepliai, šlapimas, smegenų skystis, ištirtos iš genitalijų ir ryklės. Šio metodo privalumai:

• didelis tikslumas;
• diagnozuoti ligą per dieną;
• tiksliai nustatyti infekcijos šaltinį ekstrapulmoninėje formoje;
• patogeno, net vienos molekulės identifikavimas ankstyvoje ligos stadijoje;
• tinkamas gydymo metodų pasirinkimas;
• stebėti gydymo rezultatus.

Šiame tyrime nėra jokių kontraindikacijų. Jis naudojamas diagnozuoti infekciją vaikams, nėščioms moterims. PCR diagnostikos trūkumas. Reikalauja aukštos kvalifikacijos specialistams laboratorijoje. Tyrimas atliekamas taip:

• paimti kraują iš venų;
• dedama į kolbą su specialiąja medžiaga, kuri sustabdo krešėjimo procesą;
• ląstelės yra izoliuotos iš plazmos;
• naudojant polimerazės reakciją, patogeno DNR yra izoliuota;
• net ir keleto Koch lazdelių buvimas yra infekcinio proceso įrodymas.

T-spot analizė

Tai vienas iš moderniausių, labai tikslių tuberkuliozės diagnozavimo metodų. Siekiant atlikti tyrimą, kraujas paimamas iš venų, nustatoma imuninės sistemos reakcija į mikroorganizmų buvimą. Tuberkuliozės bakterijos turi specifinių antigenų. Imunitetas reaguoja į juos - yra limfocitų ląstelių aktyvacija, kurios buvimas nustatomas tyrime. T-SPOT.TV yra tarptautinis metodo pavadinimas, kuris reiškia:

• T - imuninės ląstelės;
• SPOT - dėmės;
• TV - tuberkuliozės pavadinimas.

Tyrimo metu skaičiuojamos ant antigenų specifinių imuninių ląstelių susidariusios dėmės. Analizė atskleidžia visas ligos formas. Tokio tyrimo trūkumas yra tas, kad aktyvi infekcijos fazė negali būti atskirta nuo latento (paslėpto). Teigiami T-SPOT technikos atlikimo aspektai:

• didelis tikslumas;
• kontraindikacijų stoka;
• galimybė atlikti tyrimus žmonėms, sergantiems alergijomis, patologijomis, kurios veikia imuninę sistemą (diabetas, ŽIV infekcija);
• jokių klaidingų teigiamų rezultatų;
• gauti per pusvalandį.

Kraujo tyrimas tuberkuliozei vaikui

Vaikystėje tuberkulino tyrimas (Mantoux) atliekamas siekiant nustatyti tuberkuliozę prevencijos tikslais. Jei teigiamas rezultatas, paskirkite papildomus tyrimus. Sudėtingoje infekcinių ligų diagnozėje, naudojant pilną kraujo kiekį. Atšifravimas atliekamas pagal tuos pačius principus kaip ir suaugusieji. Rodikliai priklauso nuo amžiaus, tokios vertės rodo uždegimą:

• ESR - padidėjimas (normalus 4-10 mm / val.);
• leukocitai - padidėjimas (daugiau nei 4-8,8 x 10 iki 9 laipsnių / l);
• sumažėja hemoglobino kiekis;
• neutrofilų (nesubrendusių leukocitų) skaičius viršija 6%.

Jei pasireiškia alerginė reakcija į Mantus, atliekamas alternatyvus, modernus, labai jautrus kraujo tyrimas tuberkuliozei vaikams - QuantiFERON-TB Gold7. Nustatydama infekcinio proceso aktyvumą, nustatykite latentinę ligos formą. Tarp veiksmingų tuberkuliozės diagnostikos bandymų metodų vaikų kraujyje:

• imunosorbento tyrimas, susijęs su fermentu - aptinka infekciją sukeliančių bakterijų antikūnus;
• polimerazės grandininė reakcija - dideliu tikslumu lemia Koch tuberkulio bacilius pagal jų DNR buvimą kraujyje.

Antikūnai prieš tuberkuliozę: diagnozės metodo privalumai ir esmė

Naujasis diagnostikos metodas pagrįstas kraujo tyrimu antikūnų prieš tuberkuliozę tyrimu. Nustatant antikūnų buvimą, nustatant jų skaičių ir klasę, gydytojai gali tiksliai diagnozuoti, kad būtų pradėtas gydymas. Metodo vertę pripažįsta pediatrai.

Antikūnai prieš tuberkuliozę kraujyje

Antikūnai pavojingos patologijos sukėlėjui, kuris tapo populiarus šiuolaikiniame pasaulyje, tuberkuliozė yra specifiniai imunoglobulinai. Jau pagal pavadinimą galite atspėti, kuri sistema yra atsakinga už jų gamybą - imuninę sistemą. Antikūnų buvimo tyrimas vadinamas ELISA. Dažnai vadovėliuose galima rasti santrumpą „ELISA“. Antikūnų tyrimams atliekamas kraujo tyrimas iš venų.

Kai tuberkuliozė patenka į aktyvų kurso etapą, prasideda antikūnų susidarymas antigenams:

Antikūnai pradeda susidaryti kraujyje beveik iš karto po aktyvaus elgesio mikobakterijų kraujyje pradžios. ELISA suteikia tikslius duomenis apie ligos etiologiją, nustato etapą, kuriame jis yra.

Antikūnų tuberkuliozės tyrimas

Antikūnų tyrimas negali būti lyginamas su įprastiniu tyrimu, tai yra sudėtinga diagnostinė procedūra, kuriai reikalingas specialus tiek paciento, tiek gydytojo mokymas. Patikrinamas imuninių ląstelių su tuberkuliozės patogenų antigenais susiejimo proceso lygis ir greitis. Vykdydavo visus tyrimus naudojant fermentą. Procedūra leidžia gauti heterogeninės informacijos apie paciento sveikatos būklę, jo imuniteto kokybę.

Kraujo tyrimas paimtas iš paciento, kai jis tam tikrą laiką, pageidautina 12 valandų, nevartojo maisto, tačiau minimalus kiekis yra 1 val. Taigi, nustatyti testai ryte. Ir pacientas negali valgyti ne tik maisto, vartoti vaistus ir skysčius. Bet koks įsiskverbimas į kraują keičia patologijos vaizdą ir gali pateikti klaidingus rezultatus. Vaisto kursas nutraukiamas prieš savaitę prieš tyrimą. Tiesioginė ELISA technologija yra panaši į biocheminę analizę.

Mycobacterium tuberculosis

Infekcijos šaltinis yra tuberkuliozės paveikti žmonės. Mikobakterijos yra skreplių sudėtyje. Jis išeina iš kūno kosulio, čiaudulio, spjaudymo. Pirmasis pažeidimas išsivysto ir baigiasi 10 proc. Infekuotų tuberkuliozės požymių. Likusiuose 90% imuninė gynyba pradeda veikti ryškiai, aktyviai ir užkerta kelią patologijai. Infekcija per šį laikotarpį vyksta latentinėje (paslėptoje) formoje, mikobakterijos dauginasi.

Antikūnai prieš Mycobacterium tuberculosis nustatomi įvairiais laboratorinių tyrimų metodais ir leidžia jums laiku pradėti gydymą. Daugiau kaip 70 mikobakterijų rūšių, 5 iš jų sukelia pavojingą patologiją. Jie susivienijo tuberkuliozės komplekse:

• žmogaus tipas;
• Upingas;
• Afrikos;
• pelė;
• vakcinos padermės.

Žmogaus tipas sukelia daugumą tuberkuliozės formų ir tipų. Pagal įvairius šaltinius šis skaičius svyruoja nuo 85 iki 92%. Galvijai tampa 5–15% atvejų priežastimi. Afrikos rūšys sukelia daugumą atvejų Pietų Afrikos žemyne, apie 90%. Pelė retai diagnozuojama. Vakcinos padermė padeda išvengti. Dažniausiai liga veikia įvairius žmogaus kūno organus ir sistemas:

Likę procentai paskirstomi tokioms sistemoms:

Ekstrapulmoninės rūšys dažniau randamos pacientams, sergantiems ŽIV infekcija.

Kraujo tyrimas antikūnams prieš tuberkuliozę

Mikroskopinis tyrimas, atliekamas su skrepliais, laikomas standartiniu. Metodas turi pranašumų, pagrindinis dalykas yra didelis specifiškumas ir trūkumai. Pagrindinis trūkumas yra mažas jautrumas, kad nebūtų klaidinama, turėtų būti specialus bakterijų skaičius pasėliuose, didelė koncentracija. Efektyvumas skiriasi pagal kategorijas. Mažiausios kainos suteikia:

• vyresnių kaip 60 metų pacientų amžius;
• vaikai;
• ŽIV infekuota.

Skreplių tyrimas užtrunka ilgai, o tai dažnai nenori prarasti. Bakterijos auga skreplių kultūroje iki 8 savaičių. Per šį laikotarpį galima užbaigti nekomplikuoto tipo patologijos terapinį kompleksą su žinomu patogenu. Be mikroskopinių, naudojami dar du diagnostikos tipai:

Abi rūšys naudojamos plaučių pažeidimams nustatyti.

Diferencinė atrankos technika leidžia nustatyti antikūnų buvimą mikobakterijų tuberkulioze. Aukšti rezultatai pasiekiami analizuojant specifinius antigenus. Norėdami gauti klaidingą šio tyrimo rezultatą, neįmanoma. Bandymo analizės jautrumas:

• limfmazgiai - 61%;
• eksudacinis pleuritas - iki 100%.

Mycobacterium tuberculosis antikūnų analizės tikslas ir tikslai: t

1. Patikrinkite gydymo veiksmingumą ir teisingumą.
2. Infekcijos buvimo nustatymas.
3. Iš anksto nustatytos diagnozės patvirtinimas.

Kai ELISA tampa vieninteliu teisingu diagnostikos metodo pasirinkimu:

1. Ilgalaikis (pastovus) kontaktas su užkrėstais.
2. Profesinė veikla pacientams, sergantiems tuberkulioze.
3. Bendravimas su rizikos žmonėmis. Ilgalaikis neveiksmingas lėtinių rūšių patologijų (prostatitas, cistitas, pielonefritas) gydymas.
4. Anemija
5. Leukocitozė.

Patologijos simptomai rodo, kad reikia kreiptis į gydytoją:

• silpnumas ir greitas streso nuovargis;
• temperatūra subfebrilės lygiu;
• padidėjęs prakaitavimas naktį;
• kosulys trunka ilgiau kaip 2-3 savaites;
• skausmas krūtinkaulyje;
• mėšlungis nugaroje;
• skausmas sąnariuose ir pilvaplėvėje.

Iš viso antikūnų prieš tuberkuliozės patogenus

Testuojant antikūnų prieš tuberkuliozę turinį nustatomas bendras tam tikrų Lg formų klasių skaičius:

Tyrimo metodas yra dalis diagnostinių priemonių, galinčių aptikti tuberkuliozės, mikobakterijų sukėlėjus, ankstyvosiose infekcijos stadijose.

Todėl gaunami du sumos:

Teigiamas atsakymas yra suskirstytas į tam tikras grupes:

• aktyvios patologijos formos lokalizavimas;
• bendri antikūnai po ligos;
• TB infekcija.

Rezultatas rodo, kad gydymas yra veiksmingas, kai antikūnų kiekis yra žymiai padidėjęs virš normos.

Bandymas padeda gydytojui nustatyti jo diagnozę, kai nei rentgeno spinduliai, nei mikroskopai neatsakė tiksliai, PCR parodė patologiją, o simptomai panašūs į plaučių tuberkuliozę.

Kraujo tyrimas antikūnams prieš tuberkuliozę vaikams

Vaikai bijo imti kraujo tyrimą pirštu, dauguma jų verkia ir patenka į isteriją. Kraujas iš venų yra dar sudėtingesnis tyrimų procesas. Todėl gydytojai skiria IFA vaikams tik tam tikrais atvejais. Kas yra patvirtinimo indikacija:

• įtariamas plaučių tuberkuliozės vystymasis;
• kai kyla abejonių dėl plaučių pažeidimų diagnozės;
• skubiai reikia rasti infekcijos šaltinį;
• pasireiškiant pasikartojančių reiškinių simptomams.

Šis metodas padeda visiškai kontroliuoti patologijos eigą ir pasirinktų tuberkuliozės priemonių terapinio komplekso veiksmingumą.

Antigeno reakcija su antikūnu suteikia tikslią imunoglobulino kiekį, leidžia nustatyti, koks imunitetas yra kūdikiui. Diagnostika apdorojama naudojant įprastinius matematinius skaičiavimus. Kokios infekcijos randamos vaiko kūne:

• ŽIV;
• virusinis hepatitas;
• chlamidinių infekcijų;
• herpesinė patologija;
• mikobakterijos;
• tuberkuliozė.

Ligos stadijose yra kitokia antikūnų klasė, todėl specialistas nustato ligos vystymosi laikotarpį.

Kraujo antikūnų prieš tuberkuliozę vietoj Mantus

Mantoux testas nėra vienintelis tyrimo metodas, leidžiantis aptikti infekciją. Taip pat yra ir kitų galimybių. Tai yra specialus kraujo tyrimas. Trys analizės metodai:

1. Apskritai. Jis atliekamas ne tik su įtariama tuberkulioze. Bet kuri patologija, prasiskverbusi į organizmą, sukelia kraujo pokyčius. Tai gali būti laikoma bendra tyrimų pradžios analize. Liga aptinkama, reikalingi tolesni jos savybių paaiškinimai. Šis metodas papildo tyrimą ir nėra alternatyva.
2. Imunologinis tyrimas (ELISA). Tyrimo tikslas - nustatyti antikūnų buvimą bakterijoms, kurios sukelia tuberkuliozę. Iš esmės tai yra imunoglobulinų buvimas kraujyje. Technikos privalumai yra labai jautrūs visiems kraujo elementams ir rezultato tikslumui. Dažnai gydytojai nurodo ELISA, kai Mantoux rodo teigiamą rezultatą.
3. Polimerazės grandinės reakcija (PCR). Tyrimas atskleidžia ne antikūnų ir patogenų buvimą. Nustato mikobakterijų skaičių.

Specifinė kraujo kiekio analizė atliekama vietoj „Mantoux“, nes ji yra patogesnė, greitesnė ir suteikia optimaliai tikslius rezultatus.

Kraujo diagnostika yra patikimas būdas nustatyti mikobakterijų buvimą kraujagyslėse. ELISA metodas yra greitas, leidžiantis sutrumpinti ligos priežastis. Ypač svarbus yra vaikų amžius. Kuo greičiau vaikas gauna reikiamą gydymą, tuo lengviau ir greičiau atsigauna.

Mycobacterium tuberculosis analizė ir interpretavimas

Tuberkuliozė yra viena iš pavojingiausių ir dažniausių infekcinių ligų. Tuberkuliozės šaltinis yra mikobakterija (Mycobactrium tuberculosis) - vadinamasis Koch bacillus. Daugelis diagnostikos tipų yra pagrįsti jo aptikimu. Kaip MBT randama tuberkulioze, kaip užkirsti kelią infekcijai ir kokios bakterijos yra, ir visi turėtų žinoti.

Laboratorinės diagnostikos tipai

Šiuolaikinėje medicinoje yra keli būdai, kaip laboratorinė diagnozuoti tuberkuliozę. Dažniausiai ir efektyviau yra:

• biologinių skysčių audinių spalva pagal Zil-Nilssoną su mikroskopiniu medžiagos tyrimu;
• serologiniai metodai;
• polimerazės grandinės reakcija (PCR);
• bakteriologinis sėjimas.

Be to, naudojant tuberkuliozės diagnozę vaikams ir kai kuriais atvejais suaugusiems, naudojamas Mantoux tuberkulino testas.

Audinio-Nielsono audinio spalva naudojama MBT nustatymui paciento skreplėje. Atliekant analizės patikimumą būtina tinkamai surinkti skreplius į specialų konteinerį. Tada surinkta medžiaga yra dedama ant laboratorinio stiklo ir apdorojama Nilsono Fuchsin tirpalu. Po to jo liekanos nuplaunamos, ir histologinė medžiaga yra apdorojama sieros rūgštimi, kad ji būtų balinama.

Pabaigoje tepinėlis nudažomas metileno mėlynuoju tirpalu. Tik rūgštims atsparūs mikroorganizmai yra nejautrūs. Šis metodas netaikomas ankstyvosioms ligos stadijoms, nes dėl nedidelio mikobakterijų skaičiaus skreplėje rezultatas bus klaidingas. Be to, šis metodas netaikomas uždaroms ir ekstrapulmoninėms tuberkuliozės formoms.

Serologinis metodas pagrįstas specifinių antikūnų nustatymu kraujo mikobakterijoms. Taip yra dėl organizmo imuninio atsako į svetimkūnį. Kai Kocho lazdos patenka į kūną, imuninė sistema iš karto bando sunaikinti svetimą objektą. Gaminami imunoglobulinai, kurie atakuoja bakteriją.

Priklausomai nuo infekcijos laiko, kraujyje yra įvairių imunoglobulinų. Per 2-3 savaites nuo ligos pradžios kraujyje aptinkamas IgM. Jie rodo naujausią infekciją. Tada yra IgA ir IgG, kurie kalba apie aktyvų ligos eigą ir ilgą trukmę daugelį mėnesių.

G klasės imunoglobulinas

Šis tyrimo metodas yra labai jautrus ir gali aptikti MBT net ir uždaroje tuberkulioze. Ši diagnostinė galimybė leidžia ne tik aptikti ligą, bet ir nustatyti jo vystymosi etapą, nelaukiant ryškių klinikinių simptomų.

Polimerazės grandininė reakcija yra gana tikslus būdas tirti tuberkuliozės infekciją. Jo naudojimas leidžia nustatyti infekciją pradiniuose etapuose. PCR dėka, plėtojant molekulinę genetiką, galima nustatyti bakterines DNR ar RNR daleles paciento kraujyje ir kituose biologiniuose skysčiuose.

Šis diagnostinis metodas atskleidžia atsparius antibiotikams.

Dažnai ekstrapulmoninės tuberkuliozės diagnozė yra sunki dėl simptomų panašumo su kitomis ligomis. Inkstų tuberkuliozė, šlapimo pūslė, prostata yra kartotinai painiojama su pielonefritu, prostatitu, cistitu ir kitomis ligomis.

Naudojant PCR, atliekama šlapimo analizė su mikobakterijų tuberkulioze, siekiant nustatyti šio šlapimo sutrikimo ligos pažeidimus. Greita pristatymo procedūra ir paprasta tyrimų technologija paneigia arba patvirtina atitinkamų institucijų tuberkuliozę iki 90% tikslumu.

Bakterioskopinis metodas reiškia labai jautrius tyrimus. Tai apima tyrinėjamos medžiagos sodinimą įvairiose maistinių medžiagų terpėse. Esant tuberkulio bacilui, po tam tikro laiko šiose laikmenose augs bakterijų kolonijos. Būtent per šį metodą atsiranda antibiotikų pasirinkimas.

Medžiaga sėjama ant antibiotikų ir stebima, kuri iš jų bakterijų augimas sustoja. Šio metodo trūkumas yra tas, kad tiriant skreplį neįmanoma nustatyti ekstrapulmoninės tuberkuliozės ar jos uždaros formos.

Mikobakterijų augimas maistinėse terpėse

Mantoux tuberkulino bandymu siekiama nustatyti imuninį atsaką į į organizmą patekusį tuberkuliozės antigeną.

Mycobacterium tuberculosis, DNR nustatymas (Mycobacterium tuberculosis, DNR) serume

Tuberkuliozės ligų sukėlėjų DNR nustatymas, mikobakterijų kompleksas: M. tuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. microti, M. africanum serume pagal polimerazės grandinės reakcijos (PCR) metodą, nustatant "realiu laiku".

Tuberkuliozė (iš lotynų kalbos. Tuberculum - tubercle) - bendra, socialiai priklausoma žmonių liga. Jie serga ir gyvūnai. Tuberkuliozės sukėlėjas buvo aptiktas R. Koch 1882 m. Tai yra rūgščiai atsparios Mycobacterium genties aerobinės bakterijos (74 rūšys), plačiai paplitusios dirvožemyje, vandenyje ir gyvūnuose. Žmonėms labiausiai paplitęs patogenas yra Mycobacterium tuberculosis. Antras dažniausias yra Mycobacterium bovis. Abi rūšys yra labai atsparios daugeliui aplinkos veiksnių, o organizme jos išlieka gyvybingos labai ilgai ir gali sukelti ligas daugelį metų po infekcijos. Labai svarbu, kad mycobacterium tuberculosis galėtų sudaryti vadinamąsias L formas. Išlieka organizme, jie sukuria imunitetą tuberkulioze.

Ilgą laiką tuberkuliozė gali atsirasti latentiškai ir gali būti nustatyta atsitiktinai, nors dažnai pasireiškia tokie simptomai kaip silpnumas, nuovargis, žemos karščiavimas, naktinis prakaitavimas ir anemija bei leukopenija. Šiuo metu, nepaisant visų antimikrobinio gydymo pasiekimų, tuberkuliozė kelia grėsmę tautos ateičiai. Todėl visi diagnostiniai metodai, ypač jo latentinės formos, yra labai svarbūs.

Yra daug tuberkuliozės laboratorinės diagnostikos metodų: tepininės mikroskopijos (dažniausiai naudojama šiam tikslui), klasikinės kultūros metodas, ELISA. Jie visi turi privalumų, tačiau taip pat turi tam tikrų trūkumų, visų pirma, mikobakterijų aptikimą tik tuo atveju, jei jų yra pakankamai.

Pastaraisiais metais diagnozei buvo naudojama polimerazės grandininė reakcija (PCR). Jo didelis jautrumas leidžia aptikti atskiras ląsteles ir net DNR fragmentus tiriamoje medžiagoje. Šis metodas pašalina kryžmines reakcijas ir specifiškumas siekia 100%. PCR leidžia diferencijuoti ribotas ir išplatintas tuberkuliozės formas, ypač vaikams, net ir esant neigiamiems mikrobiologinių tyrimų rezultatams.

• nustatomos mikobakterinės DNR fragmentų specifinės dalys;
• nustatymo specifiškumas - 100%;
• Aptikimo jautrumas yra 100 mėginių mikobakterijų DNR kopijų.

Literatūra

1. Makarevich A.E. Kvėpavimo takų ligos - M. Aukštoji mokykla, 2000. - 368 p.
2. Jacobs D. et al. Laboratorinių tyrimų vadovas / Lexi-Comp./2002 - pp. 828 - 829.

• Karščiavimas, kuriam būdingas kasdieninis dvigubas padidėjimas ir kūno temperatūros kritimas. Atsižvelgiant į padidėjusio tuberkulino jautrumo arba tuberkulino anergijos foną.
• Ūminės viršutinės ir apatinės kvėpavimo takų uždegiminės ligos, ilgai susiliečiančios su tuberkulioze pacientu istorijoje.
• Nenormali reakcija į tuberkulino tyrimą (padidėjęs jautrumas arba anergija) sisteminės ligos paūmėjimo fone.
• Įtariama sisteminė raudonoji vilkligė.

Tyrimo rezultatų aiškinimas apima informaciją gydomam gydytojui ir nėra diagnozė. Šiame skyriuje pateikta informacija negali būti naudojama savianalizei ir savireguliacijai. Gydytojas atlieka tikslią diagnozę, naudojant šio tyrimo rezultatus ir reikalingą informaciją iš kitų šaltinių: anamnezę, kitų tyrimų rezultatus ir pan.

Bandymo kokybė. Rezultatas pateikiamas pagal „aptiktas“ arba „nepastebėtas“.

• „Aptikta“: analizuojamame mėginyje aptikti specifiniai mikobakterijų specifiniai mikobakterijų DNR fragmentai;
• „Nenustatyta“: analizuojamame mėginyje nebuvo nustatyta mikobakterijų specifinių DNR fragmentų arba patogeno koncentracija mėginyje žemiau bandymo jautrumo ribos.

Atkreipkite dėmesį, kad atliekant patvirtinamuosius tyrimus, PGR tyrimų laikas gali būti padidintas.

Kraujo tyrimas tuberkuliozei: kur praeiti? Kokie yra tuberkuliozės tyrimai?

Yra tiksliai diagnozuota ligų, kurios įmanoma tik atlikus laboratorinius tyrimus. Pradiniuose etapuose simptomai nėra ryškūs ir panašūs į kitas ligas. Todėl kiekvienas, turintis ilgą kosulį, nepagrįstą temperatūros kilimą ir glaudų ryšį su užkrėstais, turi būti tiriamas tuberkuliozės atžvilgiu. Laboratoriniai tyrimai gali būti atliekami ambulatorijoje gyvenamojoje vietoje arba tiesiogiai tuberkulioze.

Kraujo tyrimas tuberkuliozei

Siekiant tiksliai nustatyti ligos eigą, yra bandymų, kurie nustato gamma-interferono gamybos lygį organizme:

Diagnostiniai tyrimai pasižymi aukštu tikslumo lygiu (daugiau nei 90%) netgi tarp vakcinuotų. Kraujo tyrimas tuberkuliozei turi savo privalumus:

• Vienkartinė analizė;
• Nustato mikobakterijų buvimą abejotinais atvejais;
• Nereikia pakartotinai apsilankyti diagnostikos laboratorijose.

Bandymas naudojamas tais atvejais, kai Mantoux reakcija nesuteikia patikimų rezultatų.

Nustatyti gydymo efektyvumą naudojant polimerazės reakciją, siekiant nustatyti mikobakterijų DNR (PCR). Tai pats tiksliausias kiekybinis ir kokybinis metodas ligos gydymui aptikti ir kontroliuoti. PCR tyrimų indikacijos:

• Tuberkuliozės diagnostika;
• Mikobakterinio fokusavimo nustatymas;
• Pasikartojimo bandymai;
• Ne plaučių formų buvimas.

Po diagnozės periodiškai nustatoma PGR, siekiant ištaisyti gydymo taktiką.

Pilnas kraujo kiekis tuberkuliozei lemia bendrą kūno būklę ir susijusių ligų prisijungimą. Standartinių diagnostinių tyrimų tvarka nustato ŽIV infekcijos ir hepatito buvimą.

Kur gauti tuberkuliozės tyrimus?

Pacientas, kuris kreipėsi į gydantį gydytoją apie bendrą negalavimą, prakaitavimą, kosulį, turi būti patikrintas be tuberkuliozės. Terapeutas pasakys, kur išbandyti tuberkuliozę? Nuorodos dėl papildomų mikobakterijų tyrimų yra tokios:

• Abejotina Mantoux reakcija;
• Pažeidimų įsiskverbimas į plaučius;
• Užsidirbti medicinos įstaigose, ikimokyklinio ugdymo įstaigose, maitinimo įstaigose;
• Lankytojai iš vietovių nesėkmingi dėl epidemiologinės situacijos.

Kitais atvejais privaloma kraujo donorystė, skirta mikobakterijų tuberkuliozei nustatyti - plaučių audinių židinių buvimas, profilaktinis plaučių fluorografija.

Kiekvienas gali paaukoti kraują tuberkuliozei specializuotoje medicinos įstaigoje - tubdispanser. Visos privačios laboratorijos atlieka kraujo tyrimą, kad aptiktų mikobakterijas. Gydytojai pageidauja diagnozuoti ligą pagal jautriausią, PGR metodą.

„Mantoux“ bandymas išbando organizmo pasirengimą imuniniam atsakui į mikobakterijas, o abejotinos indikacijos yra priežastis, dėl kurios pacientui reikia PCR diagnostikos. Kraujo tyrimas yra individualus organizmo infekcijos apibrėžimas.

Kokie yra tuberkuliozės tyrimai?

Jei rentgeno vaizdas, neatsižvelgiant į klinikinį vaizdą, nustato infiltracinius židinius, pacientas turės ilgą diagnostinių tyrimų seriją. Jų tikslas yra patvirtinti arba paneigti mikobakterijų buvimą organizme. Pagrindiniai bandymai, kuriuos reikia atlikti siekiant nustatyti tuberkuliozę:

1. Kraujo tyrimas - nustatomas pagal leukocitozės ir ESR lygį. Pastarasis tuberkuliozės rodiklis žymiai viršija normą (daugiau nei 40 mm / h).
2. Antikūnų nustatymas naudojant fermentų imuninius tyrimus.
3. G klasės imunoglobulinų nustatymas serume yra specifinis specifinis mikobacilų antikūnas. Šis metodas nesuteikia pagrindo galutiniam diagnozės pareiškimui. Dideliuose miestuose, kuriuose yra didelis gyventojų tankis, serologinis metodas nėra žmogaus infekcijos rodiklis.
4. Pasaulinė organizacija „Phthisiatricians“ mano, kad mikobakterijų nustatymas skrepliuose yra privalomas tikrinimo kriterijus. Teigiamas mėginys laikomas 5 ar daugiau mikobakterijų.
5. Būtina nustatyti bakterijų jautrumą antibiotikams, o tai leidžia pasirinkti tinkamą gydymo režimą ir antibakterinių vaistų derinį. Šis metodas nėra greitas, nes jis pagrįstas sodinimo kultūra kultūros terpėse. Tai užtrunka ilgiau nei dvi savaites. Iki šiol pacientas gydomas pagal standartinę schemą. Gavus duomenų analizę, galima koreguoti taktiką ir pasirinkti kitą antibiotiką.
6. „Mantoux“ reakcija yra visuotinis masinio aptikimo mikobakterijų aptikimo metodas, naudojamas mokyklose. Šis metodas pagrįstas susilpnintų bakterijų intraderminiu įvedimu. Teigiamas yra iki 5 mm ar daugiau papulių. Odos hiperreakcija Mantoux teste yra tolesnio tuberkuliozės tyrimo priežastis.

Nuo rentgeno spindulių išradimo, pirminio fluorografijos metodas tapo pagrindiniu plaučių ligų diagnostikos metodu. Rentgeno spinduliai - svarbiausias būdas nustatyti patologinio fokusavimo lokalizaciją. Jei infiltratas yra vietovėse, kurias sunku diagnozuoti rentgeno spinduliais, būtina atlikti tomografinį tyrimą, kuris leidžia nustatyti aiškias paveiktų audinių ribas.

Mantoux odos bandymas

Tuberkulino tyrimas yra pagrindinis sergamumo rodiklis šalyse, kuriose tuberkuliozė yra nedidelė. Tyrimas apima tuberkulino suspensijos įvedimą apatinėje dilbio dalies dalyje. Po 48 valandų matuojamas audinių edemos susidarymas. Kuo didesnis papulės dydis, tuo labiau tikėtina, kad asmuo yra užsikrėtęs. Atsižvelgiama į dalyko sąlygas ir gyvenimo būdą. Tiksli Mantoux diagnozė neįmanoma.

Gali pasireikšti klaidinga teigiama reakcija patogeninių bakterijų, kurios nėra susijusios su tuberkuliozės patogenais, arba infekcijos atvejų, kai skiepijama BCG, atvejais. Vaikams, pagyvenusiems žmonėms ir ŽIV užsikrėtusiems žmonėms pasireiškia klaidingi neigiami rezultatai.

T-SPOT - tuberkuliozės tyrimai

Tai novatoriškas, labai jautrus bandymas, kuriuo matuojamas žmogaus imuninis atsakas į bakterijas. Reaguodamas į tuberkuliozės patogenų įvedimą, organizmas gamina gama interferoną (citokinus). Praktiškai tai daroma taip: pacientas paima kraują ir ant jo patenka specialus reagentas, nustatantis citokinų buvimą organizme. Rezultatai yra paruošti per 24 valandas. Bandymas nepateikia klaidingų teigiamų rezultatų, išskyrus ŽIV infekuotus pacientus.

Serologiniai tuberkuliozės tyrimai

Tuberkuliozės tyrimas diagnozuojant antikūnus kraujyje yra labai sunkus. Nepatikimas metodas. Jie negali būti naudojami aktyvioms formoms diagnozuoti. Daugelyje šalių šis metodas netaikomas.

Mikobakterijų skreplių mėginių mikroskopija

Seilės, kurias žmogaus kvėpavimo takuose išskiria gleivinės epitelio ląstelės, yra klampus skystis. Sputumo mikroskopija yra pagrindinis tuberkuliozės nustatymo metodas šalyse, kuriose yra didelis tuberkuliozės pacientų paplitimas.

Tiriamąją medžiagą renka pacientas. Paprastai imami mėginiai. Dalis skreplių dedama ant stiklo stiklo (tepinėlis). Po dažymo specialiais dažais tampa įmanoma vizualiai aptikti mikobakterijas mikroskopu.

Sputum mikroskopija yra prieinamas, nebrangus ir informatyvus diagnostikos metodas. Rezultatai gaunami per dvi valandas. Metodo jautrumas yra 60%, nes ne visi pacientai turi pakankamą nustatymą, mikobakterijų koncentraciją skreplėje. Labai maža skreplių koncentracija pacientams, turintiems bendrą tuberkuliozės ir ŽIV infekcijos patologiją.

Nepaisant mokslinių tyrimų metodų įvairovės, tuberkuliozės diagnozavimas yra labai sunkus, ypač blogai besivystančiose šalyse. Tikslus metodai nėra prieinami dėl didelių išlaidų ir aukštos kvalifikacijos darbuotojų trūkumo. Tai sukelia gydymo vėlavimą ir prisideda prie ligos plitimo.

Mycobacterium tuberculosis kraujas

PCR idėja grindžiama tuo, kad genas gali būti dauginamas in vitro, didinant kopijų skaičių milijonais kartų. PCR mechanizmas yra trumpų nukleotidų sekų sintezė in vitro tolesniam tyrimui. PCR atveju reikalinga pora oligonukleotidų (pradmenų), papildančių tiriamą fragmentą ir DNR polimerazės fermentą. Tam tikromis sąlygomis pradmenys gali atpažinti homologines sekas denatūruotoje DNR, prisijungti prie jų ir tarnauti kaip pradmenis tiriamo geno regiono kopijų fermentinei sintezei. Kiekvienas sintezės ciklas padvigubina tikslinio fragmento kopijų skaičių, t.y. produkto (amplifikacijos) kiekis PCR procese didėja eksponentiškai. 25-35 reakcijos ciklai suteikia pakankamai amplifikacijos tolesniems tyrimams net iš vieno DNR fragmento. Per kelias valandas, naudojant PCR, iš vieno DNR molekulės fragmento galima gauti daugiau kaip 50 milijardų identiškų molekulių. Taigi galima tirti tiriamame mėginyje esančią genetinę medžiagą minimaliais kiekiais.

PCR metodas teoriškai leidžia nustatyti net 1 DNR kopiją mėginyje, todėl neturi jautrumo ribos. Kitas PCR privalumas yra tas, kad jis pasižymi ne tik absoliučiu jautrumu, bet ir absoliučiu specifiškumu. PCR nesuteikia klaidingų teigiamų rezultatų, jei šis metodas yra atliekamas teisingai.

PCR metodas nepakeičia tradicinių morfologinių, biocheminių ar imunologinių metodų, bet yra būtinas ir būtinas papildymas. PCR laboratorijų organizavimo ir veikimo patirtis daugelyje ekspertų ir sanitarinių-epidemiologinių institucijų rodo, kad, nepaisant pradinių išlaidų ir pridėtinių išlaidų, medicininis ir ekonominis poveikis yra toks didelis, kad leidžia atlikti mokslinį, metodinį ir edukacinį darbą, gerokai padidinant sanitarinių ir epidemiologinių tyrimų lygį. saugumą Rusijoje.

Šiuo metu į praktinę sveikatos priežiūrą įtraukiama nauja PCR technologija - „Real-Time PCR“. Jo pagrindinis bruožas yra PCR produktų kaupimosi stebėsena ir kiekybinė analizė bei gautų rezultatų automatinis registravimas ir interpretavimas. Realaus laiko PCR nereikalauja elektroforezės, kuri sumažina PCR laboratorijos reikalavimus.

PCR metodo (PCR) privalumai

PCR (polimerazės grandininė reakcija, PCR, polimerazės grandininė reakcija) yra vienas iš patikimiausių molekulinės diagnostikos metodų (kurių objektas yra genų ar genų fragmentas). Plačiau apie PCR metodą >>>.

Pagrindiniai PCR metodo privalumai:
1. Patogeno DNR (RNR) tiesioginis nustatymas (priešingai PCR metodui, fermento imunologinis tyrimas netiesiogiai įrodo infekcijos buvimą).
2. Didelis specifiškumas.
3. Didelis jautrumas. Šis metodas leidžia nustatyti atskiras bakterijų ląstelių arba virusų DNR kopijas, t. nustatyti patogeno buvimą pirmosiomis infekcijos dienomis, kuri yra ypač svarbi kraujo perpylimo praktikoje.
4. Procedūros universalumas.
5. Analizės paprastumas ir patogumas.
6. Palyginamai mažas laikas, praleistas analizei.
7. Vidutinės ir nuolat mažėjančios išlaidos.
PCR (polimerazės grandininė reakcija, PCR, polimerazės grandininė reakcija) yra vienas iš patikimiausių molekulinės diagnostikos metodų (kurių objektas yra genų ar genų fragmentas). Plačiau apie PCR metodą >>>.

Pagrindiniai PCR metodo privalumai:
Tiesioginis patogeno DNR (RNR) nustatymas (priešingai nei PCR metodas, fermento imunologinis tyrimas pateikia netiesioginius infekcijos įrodymus).
Didelis specifiškumas.
Didelis jautrumas. Šis metodas leidžia nustatyti atskiras bakterijų ląstelių arba virusų DNR kopijas, t. nustatyti patogeno buvimą pirmosiomis infekcijos dienomis, kuri yra ypač svarbi kraujo perpylimo praktikoje.
Procedūros universalumas.
Paprastumas ir paprastumas.
Santykinai mažai laiko, praleisto analizei.
Vidutinės ir nuolat mažėjančios išlaidos.

Realaus laiko PGR

Šiuo metu į praktinę sveikatos priežiūrą įtraukiama nauja PCR technologija - „Real-Time PCR“. Jo pagrindinis bruožas yra PCR produktų kaupimosi stebėsena ir kiekybinė analizė bei gautų rezultatų automatinis registravimas ir interpretavimas. Šis metodas nereikalauja elektroforezės, kuri sumažina PCR laboratorijos reikalavimus. Dėl sutaupytos gamybos vietos, darbuotojų skaičiaus mažinimo ir poreikio kiekybiškai nustatyti DNR / RNR, šis metodas buvo sėkmingai naudojamas pastaraisiais metais dideliuose sanitarijos epidemijos, diagnostikos ir tyrimų centruose išsivysčiusiose pasaulio šalyse, pakeičiant PCR dabartiniame („klasikiniame“) formate.
Realaus laiko PCR naudoja fluorescenciją žyminčius oligonukleotidinius zondus DNR nustatymui amplifikacijos metu. Realaus laiko PCR leidžia atlikti pilną mėginio analizę per 20-60 minučių ir teoriškai sugeba aptikti net vieną DNR arba RNR molekulę.

Kaip realaus laiko PCR veikia naudojant TaqMan zondus
Realaus laiko PCR naudoja TaqMan sistemą, valdančią PCR kinetiką tiesiogiai amplifikacijos metu, naudojant fluorescencinį rezonansą. Aptikimui naudojamas zondas, turintis fluoroforą ir gesintuvą, papildantį amplifikuoto fragmento vidurinę dalį. Kai fluoroforas ir slopintuvas yra prijungti prie oligonukleotidų zondo, pastebima tik nedidelė fluorescencijos emisija. Amplifikacijos proceso metu, dėl Taq polimerazės 5'-eksonukleazės aktyvumo, fluorescencinė etiketė patenka į tirpalą, atlaisvina save nuo artimo prie slopintuvo ir generuoja fluorescencinį signalą, amplifikuotą realiu laiku proporcingai amplifikacijos kaupimui.

PCR laboratorija
transgeninių organizmų apibrėžimas

Dėl savo pranašumų PCR metodas plačiai naudojamas diagnozuojant virusines ir bakterines infekcijas, paveldimas ir onkologines ligas, HLA tipavimą, teismo mediciną, tėvystės ir asmens tapatybės nustatymą, epidemiologiją, genetiką, biotechnologijas (transgeninius gyvūnus, augalus, maisto produktų ir maisto produktų sertifikavimo srityje.

Plačiai paplitęs molekulinių biologinių metodų taikymas maisto pramonėje atsirado dėl naujų įstatymų atsiradimo Rusijos teisės aktų sistemoje, įvedančioje molekulinę biologinę analizę ir nustatant transgeninius intarpus į žemės ūkio augalų ir kitų genetiškai modifikuotų organizmų genomą, kaip privalomą atitinkamo maisto ir produktų sertifikavimo proceso dalį.

Kraujo tyrimas tuberkuliozei: normos, dekodavimas, kaip perduoti

Specialistų nuomone, kasmet tuberkulioze serga apie 8 milijonai žmonių. Ir Rusijos Federacijos gyventojų tuberkuliozės paplitimas vis dar išlieka didelis. Laimei, liga gerai diagnozuojama net ankstyvaisiais etapais. Neseniai vis labiau populiarėja šiuolaikiniai diagnostikos metodai, ypač kraujo tyrimai tuberkuliozei.

Tuberkuliozės diagnozavimo metodai

Tuberkuliozė yra lėtinė infekcinė liga, kurią sukelia mycobacterium tuberculosis. Liga perduodama oru lašeliais. Infekcijos rizika gerokai padidėja, kai imunitetas sumažėja žmonėms, sergantiems lėtinėmis ligomis ir esant nepalankioms gyvenimo sąlygoms.

Dažniausiai pasireiškia plaučiai, o plaučių tuberkuliozė yra labiausiai paplitusi ligos forma. Tačiau mikobakterijos gali paveikti vidinius organus (genitalizacijos ir virškinimo organus, smegenis ir nugaros smegenis), odą, sąnarius, limfmazgius.

Atsižvelgiant į didelį tuberkuliozės paplitimą, specialistai sukūrė ir įgyvendino ligos nustatymo programas. Visi diagnostikos metodai yra visiškai prieinami ir atliekami tiek prevenciniais, tiek diagnostiniais tikslais.

Pagrindiniai tuberkuliozės diagnozavimo metodai:

1. Krūtinės ertmės radiografija;
2. Odos tuberkulino tyrimai (Mantoux testas, diaskintestas);
3. Mikroskopinis ir bakteriologinis biomedžiagos tyrimas dėl mikobakterijų buvimo.

Taip pat yra modernesnių diagnostikos metodų, pavyzdžiui, kraujo tyrimas tuberkuliozei. Tokio tyrimo atlikimas leidžia patvirtinti infekcijos buvimą. Ypač reikšmingas yra kraujo tyrimas tuberkuliozei tokiais atvejais:

• Su ekstrapulmonine tuberkulioze (tokiais atvejais neįmanoma nustatyti ligos rentgeno spinduliais);
• Su abejotinais tuberkulino tyrimų rezultatais;
• Kai pagrindinių tyrimų rezultatai yra neigiami, tačiau asmuo yra sutrikdytas panašiais į tuberkuliozės simptomus;
• Po ilgalaikio kontakto su tuberkuliozės asmeniu.

Tuberkuliozės diagnozė kraujyje naudojant ELISA

Susitikus su mikobakterijų tuberkulioze, kaip ir kituose mikroorganizmuose, imuninė sistema pradeda gaminti specifines baltymų medžiagas - antikūnus, kurie užkerta kelią mikrobų augimui.

Taigi, kontaktuojant su mikobakterijomis, organizme gaminami specifiniai įvairių klasių antikūnai - Ig A, Ig G, Ig M. Tai yra Ig M, kuris pirmą kartą pasireiškia kraujyje, jų aptikimas rodo ūmaus infekcijos procesą. Vėliau pasirodo Ig G, tačiau jie yra saugomi kraujui visą gyvenimą. Ig G nustatymas yra įrodymas, kad organizmas jau buvo susilietęs su konkrečiu mikroorganizmu.

Fermento imunologinio tyrimo metodas (ELISA) yra pagrįstas tik antikūnų prieš Mycobacterium tuberculosis nustatymą kraujyje. ELISA pagrindu atliekamas tyrimas apima Ig klasės antikūnų, taip pat ir bendrų antikūnų (Ig A + Ig G + Ig M) nustatymą. Bandymo jautrumas yra apie 86%. Apytikriai 5–10 proc. Atvejų galimi teigiami rezultatai.

Venų kraujo tyrimą tuberkuliozei, naudojant ELISA, atlieka privačios laboratorijos. Po tyrimo rezultatai įrašomi į formą. Galimi rezultatų variantai:

• Nustatyti antikūnai;
• Nenustatyta jokių antikūnų;
• Rezultatai yra neaiškūs.

Jei buvo nustatyti antikūnai prieš tuberkuliozės mikobakterijas, tyrimo rezultatas laikomas teigiamu. Tai reiškia, kad asmuo yra užsikrėtęs tuberkulioze. Tačiau svarbu nepamiršti, kad dėl neseniai atliktos vakcinacijos gali būti klaidingų teigiamų rezultatų.

Jei tyrimo forma teigia, kad antikūnų nerasta, tyrimo rezultatas yra neigiamas. Tai pastebima tais atvejais, kai asmuo nėra užsikrėtęs tuberkulioze, arba organizme yra infekcija, tačiau antikūnų titras vis dar yra per mažas.

Jei tyrimo rezultatai yra neigiami, tačiau asmuo turi tuberkuliozės simptomų - tyrimas turi būti pakartotas po kelių savaičių.

Kraujo tuberkuliozės diagnostika pagal PGR

Kitas modernus tuberkuliozės diagnozavimo metodas yra medžiagos tyrimas naudojant PCR. Naudojama medžiaga yra ne tik veninis kraujas, bet ir skrepliai, smegenų skystis, šlapimo organų tepinėlis, šlapimas. Yra žinoma, kad visos bakterijos turi savo unikalią DNR. PCR tyrimo metodas pagrįstas Mycobacterium tuberculosis DNR fragmentų aptikimu bandomojoje medžiagoje.

PCR tyrimai yra laikomi vienu iš labiausiai jautrių ir greitų diagnostikos metodų. Taigi, bakteriologinis mikobakterijų biomaterijos tyrimas trunka kelias savaites, o PGR tyrimų rezultatai bus paruošti tą pačią dieną.

Atlikus PCR tyrimą, forma nurodys vieną iš galimų variantų:

• Nenustatyta DNR;
• DNR aptinkama.

Neigiamas rezultatas rodo, kad Mycobacterium tuberculosis nenustatyta kraujyje ar kitoje medžiagoje. Tai reiškia, kad asmuo nėra užsikrėtęs tuberkulioze. Teigiamas rezultatas patvirtina mikobakterijų buvimą. Paprastai panašus rezultatas aptinkamas su aktyvia tuberkulioze, kuri reikalauja intensyvaus gydymo.

Todėl, jei įtariate, kad liga yra įtariama, tuberkuliozės kraujo tyrimas gali būti naudojamas kaip papildomas diagnostikos metodas. Kraujo tyrimai naudojant ELISA ir PCR gali aptikti ekstrapulmonines tuberkuliozės formas ir patvirtinti diagnozę tais atvejais, kai standartinių tyrimų rezultatai yra abejotini.

Grigorov Valeria, gydytojas, gydytojas

Iš viso 1067 peržiūros, šiandien peržiūrėta 2 peržiūros